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    當前位置:首頁產品展示合作品牌白介素-7 ELISA KIT?

    • 白介素-7 ELISA KIT?

    白介素-7 ELISA KIT?
    產品簡介:

    白介素-7 ELISA KIT?采用雙抗體夾心 ELISA 法,能精準定量血清等樣本中的白介素 - 7,操作便捷,廣泛應用于免疫學等科研領域 。

    產品型號:

    更新時間:2025-07-04

    廠商性質:生產廠家

    訪 問 量 :2052

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    產品介紹

    白介素-7 ELISA KIT

    白介素-7 ELISA KIT是科研中常用的檢測工具,用于定量測定生物樣本中的白介素 - 7 含量。白介素 - 7 是由 IL-7 基因編碼的 25kDa 大小的可溶性分泌蛋白,屬于造血因子家族,在淋巴細胞的分化、增殖和存活中發揮關鍵作用。該試劑盒能助力相關疾病機制研究、藥物研發等工作。


    1. 試劑盒組成

      • 酶聯板:96 孔或 48 孔,已預包被抗 IL-7 抗體,作為反應的載體 。

      • 標準品:通常為凍干品,一般有 2 瓶。臨用前需使用標準品稀釋液進行復溶,并稀釋成不同濃度梯度,如 0、15.6、31.2、62.5、125、250、500、1000 pg/mL 等,用于繪制標準曲線 。

      • 樣本xi釋液:用于稀釋濃度過高的待測樣本,確保其濃度處于試劑盒的有效檢測范圍內 。

      • 酶標抗體:即 HRP 標記的抗 IL-7 抗體,為濃縮液,使用時需按照要求用酶標抗體稀釋液進行稀釋 。

      • 酶標抗體稀釋液:專門用于稀釋酶標抗體 。

      • 底物溶液:如 TMB 底物,可與酶標抗體中的 HRP 發生反應,從而產生顏色變化 。

      • 洗滌液:一般為濃縮液,使用時需按特定比例用蒸餾水或去離子水稀釋,用于洗滌酶聯板,去除未結合的物質,有效降低背景干擾 。

      • 終止液:多為強酸溶液(如硫酸),用于終止底物的顯色反應,使反應液顏色穩定,便于后續讀數 。

      • 封板膜:用于在溫育過程中覆蓋酶聯板,防止液體蒸發和外界污染 。

      • 使用說明書:詳細介紹試劑盒的使用方法、注意事項、性能指標等 。

    2. 樣本要求

      • 血清:采集血液后,室溫放置 2 小時或 4℃過夜,隨后以 1000×g 離心 20 分鐘,小心吸取上清液備用。采血應使用無熱原、無內毒素的一次性器材 。

      • 血漿:可用乙二胺四乙酸(EDTA)、肝素等作為抗凝劑。樣本采集后 30 分鐘內,在 2 - 8℃下以 1000×g 離心 15 分鐘,取上清 。

      • 細胞培養上清:將細胞培養上清以 1000×g 離心 20 分鐘,去除細胞碎片和雜質后,取上清用于檢測 。

      • 組織勻漿:用預冷的磷酸鹽緩沖液(PBS,0.01M,pH = 7.4)沖洗組織,che底去除殘留血液。剪碎組織后,按照約 1:9(w/v)的比例加入 PBS,在冰上充分研磨。再經 5000×g 離心 5 - 10 分鐘,取上清用于檢測 。

      • 樣本采集后若在短期內進行檢測,可保存于 4℃;若需長時間保存,需置于 - 20℃或 - 80℃凍存,且要避免反復凍融,溶血樣本一般不適合用于檢測 。

    3. 操作流程

      • 準備工作:從冰箱取出試劑盒,提前 30 分鐘使其平衡至室溫。同時,將濃縮洗滌液按要求比例用蒸餾水或去離子水稀釋備用 。

      • 加樣:設置空白孔、標準品孔和樣本孔。空白孔加入樣本xi釋液,標準品孔加入不同濃度的標準品,樣本孔加入處理好的樣本,每孔加樣量通常為 100μL,輕輕混勻,37℃溫育 90 分鐘 。

      • 洗滌:溫育結束后,棄去孔內液體,用洗滌液加滿各孔,浸泡 1 - 2 分鐘后甩干,重復洗滌 5 次,確保che底洗凈未結合物質 。

      • 加酶標抗體:每孔加入 100μL 稀釋好的酶標抗體工作液,37℃溫育 60 分鐘 。

      • 再次洗滌:重復上述洗滌步驟 。

      • 顯色:每孔加入 90μL 底物溶液,輕輕混勻,37℃避光顯色 15 - 30 分鐘(需根據實際顯色情況判斷) 。

      • 終止反應:每孔加入 50μL 終止液,此時溶液顏色由藍色變為黃色 。

      • 讀數:在加終止液后 15 分鐘內,用酶標儀在 450nm 波長處測量各孔的吸光度(OD 值) 。

      • 計算結果:以標準品濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,繪制標準曲線。根據樣本的 OD 值從標準曲線中查出對應的濃度,若樣本進行了稀釋,需乘以相應的稀釋倍數,從而得到實際濃度 。

    4. 性能指標

      • 檢測范圍:不同試劑盒有所差異,常見的檢測范圍為 15.6 - 1000 pg/mL 等區間,可滿足多種樣本中 IL-7 含量的檢測需求 。

      • 靈敏度:一般可低至 7.8 pg/mL 甚至更低,能夠檢測到樣本中微量的 IL-7 。

      • 特異性:對 IL-7 具有高度特異性,與其他細胞因子等物質幾乎無交叉反應 。

      • 重復性:板內變異系數一般小于 10%,板間變異系數小于 15%,保證了檢測結果的穩定性和可靠性 。


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